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  • 来自专栏细胞培养

    Polysciences不只有PEI:来看ConA磁珠、Fast Blue和荧光片剂如何覆盖科研实验全流程?

    关键词:刀豆蛋白A磁珠、ConcanavalinA磁珠、FastBlue、快蓝、荧光片剂、水性封片剂、Polysciences一、BioMagPlusConA刀豆蛋白A磁珠:糖生物学与表观遗传研究的重要工具刀豆蛋白 ,包括:神经回路研究神经发育过程分析神经损伤与修复研究神经退行性疾病研究三、水性荧光片剂荧光成像的重要辅助工具在免疫荧光实验过程中,最终成像质量不仅受到抗体和染色条件影响,封片剂选择同样十分重要。 合适的封片体系能够有效减少荧光衰减,并提高成像稳定性。Polysciences水性荧光片剂采用水溶性体系设计,适用于免疫荧光和组织成像实验。 主要特点包括:良好的抗荧光衰减能力较好的折射率匹配兼容多数荧光染料即用型操作方式有助于维持样本形态图3.Polysciences水性荧光片剂无论是细胞实验还是组织切片实验,该类封片体系均可用于提高样本保存稳定性并优化成像结果 关于技术来源本文内容基于Polysciences刀豆蛋白A磁珠、fastblue、快蓝、荧光片剂、水性封片剂等公开技术资料、参考文献曼博生物整理,用于科研技术交流和实验参考。

    7010编辑于 2026-05-20
  • 常见实验技术∶ 免疫染色 (IHCICCIF) Get 全流程!_MedChemExpress(MCE 中国)

    (当然,IHC 也可升级为多重荧光染色的 mIHC)。ICC 通过使用与抗体偶联的荧光染料或酶,可以分别在荧光显微镜和光学显微镜下可视化目标抗原。 IF 利用荧光显微镜检测与抗体结合的荧光染料,此外,IF 可进行多种荧光染色,允许研究人员进行多重标记,IF 的多重染色常用于评估大分子的共定位1。 封片:向载玻片上加入一滴封片剂,将盖玻片缓慢扣在载玻片上,细胞所在面靠近载玻片,用吸水纸吸除多余封片剂。2. 观察:轻轻用指甲油密封盖玻片四周,避免样品在显微镜下移动。 ② 选择合适的封片剂:封片剂的选择也很重要。常用的封片剂包括缓冲甘油、抗荧光淬灭封片液等。在选择封片剂时,需要根据实验的具体需求和标本的特性进行选择。 这可以有效地防止荧光信号的淬灭和标本的干燥,确保实验结果的稳定性和准确性。④ 细胞样品在封片剂处理后,理论上可以在 -20℃/4℃ 冰箱保存 1 周。

    1.4K11编辑于 2025-06-25
  • 来自专栏聊点学术

    如何降低荧光实验的自发荧光

    但是接触过的人都明白,免疫荧光标记存在一个很大的问题,即自发荧光。这将极大地降低实验图片的可用性和美观性。 自发荧光类似于传统IHC的背景性染色。如下图中的大片绿色荧光,几乎都是自发性荧光。 ? 自发荧光的解决办法有两种,采用冰冻切片染色或降低石蜡切片染色的自发荧光。 今日主要是探讨如何降低免疫荧光染色实验中的石蜡切片自发性荧光,且听小编慢慢道来。 对于需要精确定位的研究目标或者荧光多标记Merge来讲,这一点不得不引起重视。 2.3 石蜡切片的缺点是自发荧光太强 自发荧光是指组织未经过荧光色素染色时,在激发光下自发呈现的荧光。 5 — 抗荧光衰减剂与荧光淬灭剂 现在很多的试剂商都供应了含DAPI的封片剂,不仅可以染核,还有防止荧光淬灭的成分。 对于表达水平较低的抗原来说,使用上述试剂无可厚非。 对于表达较少或荧光信号较低的多标记实验而言,Evan's蓝或者台盼蓝染色可能会降低荧光信号的敏感度。 现在很多的试剂商都供应了含DAPI的封片剂,不仅可以染核,还有防止荧光淬灭的成分。

    2.8K60发布于 2020-07-22
  • 来自专栏聊点学术

    【原理篇】免疫荧光染色的平均荧光强度

    荧光标记是非常常用的实验方法。 一般来讲,荧光标记染色的目的有3个:①多种蛋白标记后,分析蛋白在空间上的分布特征;②免疫荧光标记后进行蛋白半定量分析,分析蛋白半定量表达量;③标记细胞核,以便分析细胞核数量,如凋亡细胞计数等。 ? 上方所述的第1条和第3条是荧光标记染色的最佳应用场景,个人并不推荐将荧光标记应用于第2条。原因在以前就讲过→【回顾:免疫荧光分析误区,别踩雷了!】 如果一定要在荧光图像上进行蛋白半定量分析呢? 2、通道分割 最简单的免疫荧光标记是DAPI(蓝)+单通道荧光(红或绿)。如下 ? ? 这种是最普通的荧光标记,图像上只有2个通道激发光。在分析之前,必须将2个通道的荧光分割开,获得2张图像。 同理,多色荧光标记其实就是多了通道而已,分割方法也是一样的。 3. 荧光强度转换为灰度 无论是JPEG格式还是TIFF格式的荧光图像,都是32bit RGB图,但是灰度图是8bit 黑白图像。

    5.1K20发布于 2020-11-25
  • 来自专栏聊点学术

    图像背景校正操作错误,结果千差万别......

    (示例明场光强差异) ◣ 1.2 荧光染色时最大的障碍就是背景染色。背景染色在整张图上不均一,导致分析时无法有效选定目标区域; ? ◣ 1.3 显微镜光路上的灰尘在图像上留下杂点,影响分析; ◣1.4 封片剂在玻片上分布不均一,拍照后得到的图像对焦不准,影响分析 以上列举的种种问题都会对图像分析产生极大影响,定量分析前必须进行图像预处理操作 ◣2.2 荧光染色图像分析的本质是灰度分析。 荧光图像分析其实就是在单通道下(红或绿或蓝),对灰度值的分析。反映出在此通道下,图像上分析目标的灰度值,以灰度值的差异代表某物质量的差异。 ? 免疫组化(DAB)和荧光染色图像校正方法? 大家最喜欢的就是采用Image Pro Plus进行图像分析,那就以此为例吧。 ◣3.2 荧光染色图像背景校正 (1)先打开一幅需要校正的荧光图像,然后打开一幅无任何组织或细胞的图像(空白图像)。

    1.4K10发布于 2020-10-21
  • 来自专栏Youngxj

    canvas荧光表源码分享

    无聊看了一下网页制作从入门到放弃的书,看到一个canvas表盘案例觉得不错,就搞出来美化了一下,就是这个鸟样子 <!DOCTYPE html> <html> <head> <meta charse

    81430发布于 2018-06-07
  • 来自专栏量子化学

    荧光光谱的理论计算

    如果周围介质碰撞不足以吸收电子激发能,分子从S1的ν=0能级降至S0的某些ν>0能级便产生荧光,可用如下简化的Jablonski能级图表示。简言之,从S1到S0的电磁辐射,即为荧光荧光光谱有如下特征: (1) Stokes位移 荧光发射波长总是比相应的吸收光谱的波长长,称为Stokes位移,如下图所示。 ? 知道了荧光产生的原理,便可知道荧光的计算方法,一般来说有以下两种方法。第一种方法步骤少,原理不是十分严格,但结果一般都可以使用;第二种方法比较严格,但计算比较复杂,结果比较准确。 以下以环己烷溶液中的香豆素153分子为例,说明荧光的两种计算方法。分子结构如下: ? ,严格符合荧光的定义,结果为2.73 eV。

    7.3K30发布于 2020-07-27
  • 二级域名不死原理 域名防新策略 网站抗技巧 DNS解析防 CDN域名保护 子域名抗

    二级域名不死技术顺势而生,成为域名防的核心创新策略,为网站稳定运营提供新路径。一、二级域名不死的核心定义二级域名不死,即一级域名被封禁后,其下属二级子域名仍可正常访问。 结语二级域名不死技术打破“一级域名封禁即全站瘫痪”的困境,为运营者提供灵活可靠的抗方案,但无法完全杜绝封禁。运营者需遵守法律法规与平台规则,合规经营才能长期稳定发展。 综上,二级域名不死技术凭借独特原理与广泛应用,成为互联网时代网站抗的重要手段,本人主页有更多文章,为网站稳定运营保驾护航。

    31210编辑于 2026-04-05
  • 来自专栏聊点学术

    什么是荧光原位杂交(FISH)?

    近来,有伙伴在后台咨询了荧光原位杂交(FISH)实验的相关知识,因此小编想在今天推文简单聊一聊FISH实验,也讲点新花样。 01 — 什么是FISH FISH:采用了已知序列的、特异性的单链核酸作为探针,标记了生物素或荧光素,在一定的温度和离子浓度下通过碱基互补配对法则,使得DNA-DNA原位杂交,采用荧光法显示,最终将DNA FISH的大致步骤分为探针变性、标本变性、杂交、洗脱、杂交信号放大(适用于适用生物素标记的探针)、复染、封片、荧光显微镜观察FISH结果。 每一次荧光显微镜的观察都会淬灭一部分信号,因此一定要快速观察和采集图像。有条件的话,小编推荐大家尽量选用共聚焦显微镜采集图像,荧光显微镜备选。 ? 免疫荧光标记+FISH,这里面更为复杂,小编才疏学浅,溜了溜了。 The end.

    1.6K20发布于 2020-07-22
  • 来自专栏量子位

    和免疫荧光标记说拜拜 | 谷歌Cell论文:深度学习模型预测荧光位置

    可如果想要知道细胞核确切的位置,或者分析神经元树突的数量或要看细胞是死是活,此前的办法是必须要结合免疫荧光标记法,然后用荧光显微镜观察。 ? 即使十万分小心走完了前面所有的步骤,到最后上荧光显微镜的时候还得面临光漂白的囧况。 这还只是固定的片子。荧光标记还有个不可忽视的缺陷,染料有毒。 活体细胞上了荧光之后活不了多久,所以那些时间跨度很长的生理实验就别想了。 怎么样清晰定位目标物,同时还能绕开免疫荧光标记的缺点呢? 样本无需荧光染色,用深度学习模型就可预测出目标物的位置。 ? 不仅省去了免疫荧光繁琐的过程,还不用担心背景噪音、不同荧光染料串色的问题。 不同的level表示不同的荧光标记物,马赛克的位置表明该实验样品没有进行此类荧光标记。 ?

    85430发布于 2018-07-24
  • 来自专栏高性能服务器开发

    情书

    亲爱的小芳姑娘:   你好呀!茫茫人海中,我们因路由器而邂逅,因网线而相识,因无线而相知。自从第一眼看见你,你就犹如一鲁棒的系统而深深地吸引了我:你如C脱胎于汇编般的新颖,你如C++操作内存般的的潇洒,你如Java回收内存般的伶俐与轻盈,你如ActionScript 3.0的深思熟虑的架构般的备受期待,你如IDL化史超般的令我又爱又恨。人生真是奇妙呀,所以,想你的时候,哦,抬头微笑。   我这个人有很多的缺点,为了赢得姑娘你的芳心,我决定如苹果与Adobe般的与这些坏毛病决裂,不仅思想上的IPAD不支持这

    88650发布于 2018-04-04
  • 来自专栏分子生物和分子模拟计算

    荧光探针分子与蛋白质的作用

    通过分子对接和分子动力学模拟,验证探针分子与蛋白的作用形式和结合位置,解释荧光发光的机理。

    47830发布于 2018-07-03
  • ABDP 493503 别名:中性脂滴荧光探针(AbMole)

    ABDP 493/503是一种非常实用的中性脂滴荧光探针,它因其高选择性、良好的光稳定性和对pH不敏感的特性,成为脂代谢研究中的重要工具。 光谱性质:最大激发波长 493 nm,最大发射波长 503 nm,发出明亮的绿色荧光。稳定性与储存:固体粉末应在-20°C下避光保存,以避免荧光淬灭。配制成溶液后,建议分装冻存,并避免反复冻融。 当染料进入脂滴的疏水环境后,其荧光强度会显著增强。因此,在荧光显微镜下,可以看到脂滴发出明亮的绿色荧光。 实验应用脂滴标记与成像:可用于活细胞或固定细胞的脂滴标记,适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜、双光子显微镜等多种成像平台。它可以清晰显示脂滴的大小、数量和分布。 避光操作:所有操作步骤应尽量避光进行,以减缓荧光淬灭。图像采集:使用FITC或GFP的滤光片设置进行图像采集。

    39910编辑于 2025-11-10
  • 来自专栏百味科研芝士

    如何利用ImageJ进行荧光强度测量?

    导言 ImageJ是一个很强大的图片处理工具,那么对于我们平时拍的带有荧光色彩的图片,想要测量荧光的强度用来进行定量描述,这些都可以用ImageJ来进行完成,如下图所示,我们可以对其进行荧光强度测定 这里我们使用软件内置的图片进行教程的素材,选择荧光细胞的图片进行接下来的分析。 ? 2. 首先将图片进行拆分成单通道的图片才可以进行测量,先点击更改通道。 ? ? 3. 然后点击拆分通道 ? 4. 此时图中的荧光就会被选中。 ? 8. 接下来我们选择要测量的指标,选择Analyze里面的设置测量参数。 ? 9. 勾选平均密度值,限定到阈值,展示标签即可。 或者直接按快捷键Ctrl+M,即可进行测量,此时就会出现我们需要的C1区的荧光强度。 ? 11. 同理,我们进行C2和C3的测量,得到结果。 ? 12. 所以,这张图片的荧光强度就是C1,C2和C3的总和,直接相加进行作图即可。怎么样,学会了么?

    32.1K11发布于 2020-09-22
  • 来自专栏纳米药物前沿

    Small:生物可降解的微藻载体实现可视化乳腺癌肺转移的靶向递药

    丰富的叶绿素赋予SP @ DOX出色的荧光成像能力,可用于体内无创跟踪和实时监测。 此外, 螺旋藻中固有的叶绿素具有荧光特性,无需任何额外的荧光标记就可以在体内进行无创追踪。微藻的最新研究进展已经证明了其在药物装载,靶向递送和荧光成像方面的巨大生物医学潜力。 未修饰的螺旋藻细胞在适当的激发下自发显示强红色荧光信号,表明螺旋藻中固有叶绿素的自发荧光特性。作者用RF-6000荧光分光光度计在552 nm激发下进一步检查水中螺旋藻的荧光发射光谱。 使用紫外-可见光谱和荧光光谱检测计算出不同药物/载体比率的药物装载效率和包效率。在所选定的DOX浓度下,螺旋藻的载药量可超过85%,与以前对微/纳米载体的研究相比,其载药量更高。 在12小时之前,包效率随载药时间的延长而增加,此后螺旋藻结构可能受到破坏,导致包效率低,这表明螺旋藻的最佳载药时间窗为12小时。

    81440发布于 2021-02-04
  • 来自专栏聊点学术

    【分析篇】荧光共定位的散点图解析!

    聊点学术 上期推文中,我强调了荧光共定位定量分析的三大要点。→【操作篇】荧光共定位的定量分析! 说明:蛋白A和蛋白B存在一定的共定位关系,但蛋白A荧光强度高于蛋白B。 ? ● 形态2: 总体呈直棒形状,线性分布,对角分布。 说明:蛋白A和蛋白B存在很强的共定位关系,且蛋白A荧光强度与蛋白B基本相当。 ? ● 形态3: 总体呈棒槌状,基本线性分布,靠近X轴(红色通道)。 (2.3)散点图中4代表的是共定位荧光图像中的背景荧光,该区域内散点越多,说明背景荧光越强,散点图中会呈现以下形态。 ? 下期预告:单通道荧光的散点图获取 往期推荐阅读: 各种细胞器典型标记物。 什么是荧光原位杂交(FISH)? 如何降低荧光实验的自发荧光? Co-IP免疫共沉淀 【长文】—染色质免疫共沉淀(ChIP)原理及注意事项 Ending

    3.8K30发布于 2020-09-04
  • 来自专栏全栈程序员必看

    JS深入了解

    js变量的范围分成两个:全局变量、局部变量。在全局变量的函数外声明变量,内部功能可以直接调用全局变量。声明变量里面的函数必须使用var 命令,否则,它里面的函数声明一个全局变量。

    65120编辑于 2022-07-06
  • 来自专栏生命科学

    H2DCFDA | ROS 荧光探针检测法

    g) 加入 1 mL 无血清细胞培养基或 PBS 重悬细胞,用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察,也可以用荧光酶标仪或流式细胞仪分析 (Ex/Em=488/525 nm)。 ■ 贴壁细胞 注:若用荧光分光光度计或流式细胞仪检测贴壁细胞,可先对贴壁细胞进行消化、收集,重悬后参考悬浮细胞的检测方法。 此外,用 H2O2处理细胞,HKPerox-2 的荧光 30 分钟内就可以到达高峰。染色效果看图5c,亮眼的绿色荧光。使用方法和 H2DCFDA 的差不多。 HKSOX-1、 HKOH-1r:分别是超氧阴离子自由基 (O2•−)和羟基自由基 (•OH) 荧光探针。动物细胞操作同上,使用浓度、孵育时间如有雷同纯属巧合。 可用于成像和检测活细胞的内源性超氧化物 HKPerox-2 对 H2O2 有高度选择性,绿色荧光探针。 HKOH-1r 用于检测活细胞中的内源性羟基自由基 •OH。

    1.6K10编辑于 2023-03-10
  • 来自专栏德迅

    为什么要UDP?

    UDP,全称User Data Protocol,中文名为用户数据报协议,是一个简单的面向数据报的非连接运输层协议,意思是UDP在传送数据前不与对方建立连接,而是直接将应用程序发来的数据在收到的那一刻,按照原样发送到网络上的一种机制。大部分内容是不需要udp的,除非必须要使用到udp协议的内容比如开游戏,还有各种靠udp协议来传输的内容,在这里我就不具体说明了,需要udp的你肯定会知道的。

    2.5K30编辑于 2022-05-12
  • 来自专栏王拥军的专栏

    苹果的不是热更新,的依然是底层敏感接口

    本文主要探讨了苹果封杀热更新之后,对软件更新和游戏更新的影响,以及苹果对热更新框架的禁止是否合理。作者认为,软件的更新和游戏更新,不应该完全依赖于热更新,而应该采用更加安全和可靠的方式来实现。同时,作者也对苹果禁止热更新的原因进行了分析,认为这主要是出于安全和商业利益方面的考虑。文章还探讨了热更新框架的潜在问题,包括软件更新和游戏更新的安全性、可靠性、稳定性等方面,以及热更新框架对软件开发商和用户的影响。总的来说,文章认为热更新框架并不是软件更新和游戏更新的最佳选择,应该采用更加安全和可靠的方式来实现。

    3.6K10发布于 2017-06-09
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