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细胞转染小秘籍 | MedChemExpress
先前小 M 已经介绍过各种转染方法的优缺点了 (见 “六合心法” 有三式~)，在传统的转染方法 (如磷酸钙法、电穿孔法、病毒法等) 转染效率低、细胞毒性大、重复性差的情况下，以 Lipo3000 为主的阳离子脂质体转染试剂脱颖而出 想要高效又价美的转染试剂吗？ 但对于一些难转染细胞，建议刚开始转染前使用无血清培养基，至少转染一小时后再换成有血清培养基。小白: 那培养基中含有抗生素会对细胞转染有影响吗？小M: 可添加抗生素。 如有必要，可在 1:1-1:5 的范围内调整以优化转染效果。最佳转染条件因不同的细胞类型和培养条件而有所区别，转染前，可做预实验摸索最佳转染比例。 小M: 此外，除了转染质粒 DNA，我们的转染试剂也适用于 RNA 转染~小白: 那可以同时转染两个质粒吗？小M: 当然也可以啦！
51710编辑于 2023-02-15 PEI MAX转染试剂配置方法详解：HEK293悬浮细胞PEI转染流程与优化经验
关键词：PEI转染、PEI MAX、PEI MAX 40K、HEK293转染、悬浮细胞转染、基因递送、AAV生产、重组蛋白表达一、为什么PEI仍然是当前最常用的转染试剂之一？ 在基因表达、重组蛋白生产以及载体开发过程中，如何将外源DNA高效递送进入细胞一直是实验成功的关键环节。 三、PEI转染体系有哪些优势？PEI转染体系能够长期被广泛采用，与其综合性能密切相关。相比部分商业化脂质体产品，PEI在保证较高转染效率的同时，具有更好的成本优势和规模化潜力。 转染前准备转染前2～3小时，将细胞密度调整至约1×10⁶ cells/mL。细胞应保持良好活率和稳定生长状态，以保证后续转染效果。 六、影响PEI转染效率的关键因素在实际实验过程中，PEI转染效率受到多个因素共同影响。首先是细胞状态。细胞活率、代次以及培养状态都会直接影响转染结果。通常建议选择对数生长期细胞开展实验。
5310编辑于 2026-05-29- 来自专栏细胞培养
Polysciences PEI转染优化指南：293T、Expi293F与CHO-S瞬时转染效率及蛋白表达提升策略
关键词：PolysciencesPEI、PEIMAX、23966、24765、PEI转染试剂、瞬时转染、HEK293T、Expi293F、CHO-S、抗体表达、重组蛋白表达、转染优化一、为什么PEI转染体系仍然是主流瞬时表达方案 二、PEI转染体系中哪些因素最容易影响转染效率？PEI转染过程中，影响实验结果的因素很多，但其中最核心的部分通常包括细胞状态、DNA质量、DNA:PEI比例以及复合物制备过程。 优化维度通用要求293T（贴壁）Expi293F（悬浮）CHO-S（悬浮）传代次数≤30代，避免细胞基因型/表型漂移推荐10-25代推荐5-20代推荐10-30代细胞活力转染前≥95%转染前≥95%转染前 ≥98%转染前≥95%生长阶段严格对数生长期转染时汇合度70-80%转染时密度2.0±0.2×10⁶cells/mL转染时密度2.0-3.0×10⁶cells/mL支原体污染绝对禁止每2周检测一次每2周检测一次每 七、PEI转染过程中常见问题如何排查？PEI体系虽然成熟，但在实际实验中仍然可能出现转染效率低、细胞毒性高或者表达量不足等问题。
13210编辑于 2026-05-18 ZETA life转染试剂助力揭示lncRNA Gm28309在RAW264.7和THP-1巨噬细胞中调控布鲁氏菌炎症反应的ceRNA机制
ZETA life转染试剂（AD600150）的应用 转染细胞及基因： • RAW264.7细胞（小鼠巨噬细胞系）： ◦ 转染基因：lncRNA Gm28309过表达质粒（Gm28309-pcDNA3.1 • THP-1细胞（人单核细胞系，经PMA诱导为巨噬细胞）： ◦ 转染基因：siRNA靶向候选lncRNAs（如P33714、P3852等）。 4. 转染实验数据及解读 具体实验数据： 1. ◦ 解读：ZETA life试剂高效递送Gm28309质粒，验证了其对炎症的负调控作用。 2. RAW264.7转染miR-3068-5p mimic（图5C, 5D）： ◦ 结果：miR-3068-5p过表达降低kB-Ras2（NF-κB抑制因子）的荧光素酶活性，激活炎症通路。 ◦ 解读：试剂高效转染miRNA，揭示ceRNA调控机制。 ZETA life试剂的贡献： • 高转染效率确保基因操作（过表达/敲低）的可靠性，支撑了全文分子机制验证。
39710编辑于 2025-05-23纳米快递员已上线! LNP 精准投递_MedChemExpress(MCE 中国)
细胞转染不顺利？基因递送总是失败？别担心！ MCE LNP 试剂盒：纳米级解决方案，细胞顺利签收• 精准投递，细胞无可拒签：LNP 特有的跨膜转运及逃逸机制，实现 RNA 的高效递送；• “零”暴力拆箱：温和转染，微量样品的包封率 > 80%，递送效率高 HY-K2018 OptiLNP RNA Transfection Reagent• mRNA 转染-转染性能更优异 (24 孔板, 0.5 μg eGFP mRNA 转染 24 h 后荧光拍摄)• siRNA 转染-基因沉默效率更优异 (30 nM CY3 标记的 siRNA，转染后 6 h 进行荧光拍摄)HY-K2022 In vivo OptiLNP RNA Transfection Reagent 未来，LNP 技术将帮助我们继续功课更多科学难题，迎接一个更加精准、高效的科研时代！
65110编辑于 2025-06-25- 来自专栏生命科学
细胞转染、重组蛋白、荧光素酶检测试剂盒实验 | MedChemExpress
(PolyFast Transfection Reagent) 细胞转染主要将 DNA/RNA 导入真核细胞；转染方法五花八门，常见的转染方法可分为化学法、物理法和生物法。 先了解一下常见的几项转染技术 不同转染技术都有各自明显的优缺点，是不是不知道该怎么选择啦？告诉你一个绝招吧！ 相关产品 PolyFast Transfection Reagent 高效低毒、操作简便、重复性好的转染试剂盒。可高效地对 DNA、RNA进行转染。 对多种常见细胞具有高水平转染效率，对原代细胞和难转染细胞也具有较好的效果 Anti-Flag Affinity Gel 是一种纯化的小鼠 IgG2b 单克隆抗体，共价连接琼脂糖 Sepharose 4B 可用于大肠杆菌、酵母、昆虫和哺乳动物表达系统中表达的Flag标记蛋白的高效纯化或免疫沉淀 (IP)。
51310编辑于 2023-03-03 NK+HEK293细胞双杀！AD600150玩转Trim28-Eomes互作实验
ZETA life转染试剂（AD600150）在实验中的应用转染试剂型号：Advanced DNA RNA Transfection Reagent（货号：AD600150）转染细胞及基因：• 原代小鼠 NK细胞：转染Eomes过表达质粒（用于验证Eomes对DX5表达的挽救效应）。 ◦ 转染HA-Trim28和Myc-Eomes（研究Trim28介导的Eomes泛素化降解）。 ◦ 转染siRNA靶向Trim28（验证Trim28对Eomes蛋白水平的调控）。4. 转染实验数据及贡献分析实验数据定位1. 原代NK细胞转染Eomes（Fig.5E）： ◦ 实验内容：通过转染Eomes过表达质粒，恢复gp96缺陷型NK细胞中DX5的表达。 5.转染试剂的核心贡献• 高效递送能力：成功转染难转染的原代NK细胞（转染效率>60%），为功能挽救实验提供技术保障。
23710编辑于 2025-05-27- 来自专栏转染
LONZA 4D核转技术--查找适合自己实验的程序
（RNPs）或蛋白质引入细胞以改变其基因组成或功能——这一过程称为转染——在许多生命科学应用中是必不可少的。 目前存在多种转染方法，选择合适的方法取决于其是否适合您的特定需求。之前使用过 电转和脂质体转染。 1.电转对细胞损伤大，也需要足够量的细胞基数，不适用于微量细胞；2.脂质体转染主要适用于贴壁细胞，原代悬浮细胞不适用。LONZA 4D核转技术相对而言更适用于原代悬浮细胞。 Nucleofector®技术是一种改进的电穿孔方法，能够高效转染原代细胞，干细胞，神经元和细胞系。 关于敲除程序的选择，可以在LONZA官网查找LONZA官网给出了很多转染技术以及不同细胞类型的转染具体信息，可参考下面的网址Knowledge Center | Lonza例如DC细胞的转染protocol
40910编辑于 2024-12-02 circ-0008102过表达与敲低：ZETA life转染试剂在K562细胞中的应用
ZETA life Advanced DNA RNA转染试剂（货号：AD600150）的应用 • 转染细胞：K562细胞（人慢性髓系白血病细胞系）。 • 转染基因： ◦circ-0008102过表达载体（circ-0008102 overexpression vector） ◦circ-0008102 siRNA（si-circ-0008102 转染实验数据及解读 • 实验数据来源： ◦Supplementary Fig. S1：circ-0008102过表达或敲低对γ-珠蛋白mRNA表达的调控（P<0.05）。 • 数据解读： ◦ZETA life转染试剂高效递送circ-0008102载体和siRNA至K562细胞，验证了circ-0008102通过调控γ-珠蛋白和miRNAs参与β-thal的分子机制 ◦转染效率高，数据重复性好，支持了circ-0008102作为生物标志物的结论。 • 主要贡献： ◦为circ-0008102功能研究提供可靠的基因操作工具。
22100编辑于 2025-05-23- 来自专栏芒果先生聊生信
HEK293细胞系，最全总结
293T细胞容易转染，用磷酸钙、PEI或脂质体转染，效率均可达90%以上。除用于基因表达及蛋白生产外，还用于慢病毒、逆转录病毒及腺病毒的包装。 ? 293T/17细胞是293T细胞中共转染pBND和pZAP质粒而获得的具有G418耐受的细胞系。该细胞系仍保留高转染效率的特点。 293H细胞是293细胞驯化后得到的、能够在无血清培养体系下快速生长、具有高转染效率及高效蛋白表达性能的细胞系。该细胞系贴附牢固，主要用于噬菌斑检测等。 293SG是293S细胞用甲基磺酸乙酯诱变处理，蓖麻毒素选择后再转染pcDNA6/TR质粒得到耐受蓖麻毒素的细胞系。 293SGGD细胞系是在293SG转染pcDNA3.1-zeo-STendoT质粒的细胞系，其主要用于糖基化工程研究中。
7.5K20发布于 2020-08-28 - 来自专栏生命科学
实验操作 | 质粒构建、转化、提取、鉴定、转染、测定（完整版）| MedChemExpress (MCE)
(2) 阴性对照组 (NC)：SH-SY5Y 细胞转染阴性对照质粒。 (3) 过表达组 (PC)：SH-SY5Y 细胞转染过表达质粒。 3转染细胞铺板 24 h 后，按照 Lipofectamine 说明书用其进行转染。 转染 48 h 后，荧光显微镜下观察其 GFP 的表达情况及统计其转染效率 (对明场及暗场荧光细胞计数，得：转染效率 = 暗场荧光细胞个数 / 明场细胞个数；也可通过流式等观察统计其转染情况)。 结果显示，阴性对照组和 Parkin 过表达组细胞内可观察到较多的绿色荧光蛋白表达，而正常组细胞没有观察到，则质粒成功转染至细胞内。图 5. 转染后荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达[1]。A. 转染后 SH-SY5Y 细胞内 Parkin mRNA 表达情况：RT-PCR 结果显示，Parkin 过表达质粒转染后，正常对照组与阴性对照组的 Parkin-mRNA 水平没有明显差异 (P>0.05
2.1K11编辑于 2024-06-28 Nat. Biotechnol. | 多目标优化AI赋能脂质纳米颗粒工程，实现精准mRNA递送
该方法整合高维脂质结构表示、细胞类型分辨的转染数据以及多任务优化策略，使模型能够同时学习“高效递送”与“组织特异性”之间的结构–功能关系。 进一步的基因编辑实验表明，该系统能够在体内实现高效且高度特异的软骨细胞编辑，并在骨关节炎模型中实现持续的组织保护效果。这些结果表明，多目标AI优化能够推动RNA递送从“高效”迈向“精准”。 例如，在骨关节炎治疗中，需要高效递送至软骨细胞，同时避免在肝细胞中的非特异表达。这种“多目标优化”问题正是传统方法难以解决的关键挑战。 多目标筛选与候选脂质发现 通过对4万种虚拟脂质的筛选，模型成功识别出一系列兼具高效率与高选择性的候选分子。 结果显示，在关节组织中，超过60%的转染细胞为软骨细胞，而非成纤维细胞或免疫细胞。 相比之下，传统LNP主要转染成纤维细胞，缺乏细胞类型选择性。
17010编辑于 2026-05-08- 来自专栏LN生物笔记
分子生物学实验技术——荧光素酶实验
同时，为了减少内在的变化因素（如：培养细胞的数目和活力的差别，细胞转染和裂解的效率等)对实验准确性的影响，将带有海肾荧光素酶基因(Rinilla luciferase 的质粒(pRL-TK)作为对照质粒与报告基因质粒共转染细胞 高效，检测快速，每个样品只需几秒钟。 双报告基因则通过共转染的“对照”作为内参为试验提供基准线，从而可以在最大程度上减小细胞活性和转染效率等外在因素对实验的影响，使得数据结果更为可信。 与此同时，引入包含Renilla luciferase基因的TK载体作为内参，以便消除细胞转染等因素带来的组间误差。 ✅海肾荧光素酶通常作为内参报告基因，在实验操作的过程中，常遇到由于个人操作造成的实验误差，比如细胞数目不均一、细胞代次不统一、转染效率不一致等。
1.9K30编辑于 2023-02-23 - 来自专栏纳米药物前沿
徐福建杨明AS：乳糖衍生的CRISPR Cas9递送系统用于体内高效基因组编辑以治疗原位肝细胞癌
安全有效的递送载体是CRISPR / Cas9系统体内高效基因编辑的需求。乳糖（一种天然糖）可以特异性结合在肝细胞癌（HCC）细胞表面高表达的去唾液酸糖蛋白受体。 在此，北京化工大学徐福建和山东第一医科大学附属肿瘤医院杨明提出了具有大量可还原的二硫键和羟基的乳糖衍生的分支阳离子生物聚合物（LBP）作为CRISPR / Cas9系统的潜在递送载体，用于体内高效基因组编辑以治疗原位肝细胞癌 LBP具有出色的可降解性，生物相容性，基因转染性能和HCC靶向能力。 根据生物物理和细胞学特征，LBP具有良好的还原反应降解性，生物相容性，转染性能和ASGPr介导的靶向能力。作为典型的CRISPR / Cas9系统，已证明pCas9-survivin抑制HCC的活性。
57010发布于 2021-02-04 AbMole细胞实验必备：G-418--构建稳定转染细胞株的关键分子
G-418（遗传霉素，AbMole，M2719）一种在分子生物学和细胞生物研究中常用且重要的工具分子，多用于细胞转染后的筛选、转基因动植物研究等实验。 在真核细胞转染或者原核转化中，实验人员可以选择Neo基因（编码氨基糖苷磷酸转移酶，APH）作为筛选标记，与目的基因串联一起进行转染/转化。 成功转染的细胞即可获得对 G-418 的抗性。 G418结构式二、G-418用于稳定转染细胞筛选在细胞生物学研究中，稳定转染细胞系的建立是深入研究基因功能、信号通路等的重要手段。 确定最佳筛选浓度后即可进行筛选，一般在转染后的24小时将细胞消化重新铺板，在上述操作中需要控制细胞的密度，不要超过50%，待细胞再次铺板完成后即可加入筛选培养基，注意每隔3~5天更换一次筛选培养基。
25910编辑于 2025-12-01- 来自专栏细胞培养
PEI转染试剂在293T、Expi293与CHO-S蛋白抗体瞬转中的应用：PEI MAX、Transporter 5与MAXgene GMP技术解析
但瞬时转染体系也高度依赖实验参数，尤其是转染试剂性能、细胞状态、质粒质量、培养条件和转染复合物形成条件。任何一个变量不稳定，都可能造成表达量波动、细胞活率下降、放大失败或批次间重复性差。 首先是转染效率不足，尤其在CHO-S等相对难转染细胞中，外源DNA进入效率偏低会直接导致蛋白或抗体表达量不足。 其次是细胞毒性问题，如果转染试剂或DNA复合物比例不合适，细胞在转染后活率快速下降，即使初始转染效率较高，最终收获产量也可能并不理想。 五、PEI转染试剂的配制与储存注意事项PEI转染体系的稳定性与配制方法密切相关。 九、常见转染问题与排查思路当转染效率偏低时，首先需要排查细胞状态。传代次数过高、支原体污染、细胞结团、细胞活率下降或细胞长期处于非理想培养条件中，都可能导致转染效率明显下降。
16710编辑于 2026-05-13 - 来自专栏DrugAI
Nat. Nanotechnol. | 基于Transformer神经网络的脂质纳米颗粒智能设计
这一基于Transformer的神经网络不仅能准确预测LNP的转染效率，还能够扩展到非常规配方，如双可电离脂质和聚合物材料。 与传统回归不同，COMET使用排序学习目标来提升对转染效率的区分能力，并辅以噪声增强、梯度对齐和集成学习等策略以增强鲁棒性。 该数据集包含3000余种LNP配方，覆盖不同脂质种类、合成条件和摩尔比例，转染效率以萤光素酶信号量化并归一化。 配方因素对LNP效率的影响 实验显示，可电离脂质的选择对转染效率影响显著。 在更贴近药物发现场景的“命中测试”中，COMET依然保持较强预测能力，并能以近80%的准确率将高效LNP分类到前半区。 与传统方法相比，COMET在区分高效与低效配方时表现突出，尤其是在面对非典型配方（如双可电离脂质、聚合物-脂质混合物）时展现出更强的泛化能力。
29920编辑于 2026-01-06 - 来自专栏DrugOne
Nat. Mater. | 利用机器学习和组合化学加速发现可电离脂质mRNA传递
作者筛选了包含这些脂质的脂质纳米粒子的mRNA转染效率，并使用这些数据作为训练各种机器学习模型的基础数据集。 这200种新的可离子化脂质被用于配制mLuc LNPs，并用相同的方法在HeLa细胞中评估其转染效率（图2k）。 作者假设这些584种脂质的结构数据及其相应的mRNA转染结果可以用于训练ML算法（图3a）。 这种识别高性能脂质的简化方法比传统方法更为高效，传统方法需要在湿实验室中大量合成和筛选整个40,000种脂质库。 尽管119-23和SM102 LNPs在肝脏内皮细胞和上皮细胞的转染率相当，但119-23在转染肝脏中性粒细胞、自然杀伤细胞和B细胞方面表现优越（图4i），在转染脾脏巨噬细胞和CD11b+自然杀伤细胞方面也表现突出
63810编辑于 2024-06-18 - 来自专栏生命科学
MCE | 抗生素抗性筛选
转染与抗生素筛选 转染 (Transfection) 是真核细胞主动或被动导入外源核酸片段而获得新表型的过程，引入的遗传物质 (DNA 和 RNA) 稳定或暂时存在于细胞中，据此，转染可分为稳定转染和瞬时转染 稳定转染：引入的遗传物质常带选择性标记基因，它们被整合到宿主的基因组中，即使在宿主细胞分裂传代后也能维持转基因的表达。即稳转的细胞系通过一些选择性标记反复筛选，得到稳定转染的同源细胞系。 瞬时转染：引入的遗传物质仅在有限的时间内表达，并且不会整合到基因组中。遗传物质也会因环境因素和细胞分裂而丢失，瞬时转染维持时间较短，需尽快在蛋白或基因水平进行相应的检测。 因此，抗生素抗性标记是区分稳定转染和瞬时转染的有效方法。 在原核/真核生物转染实验中常用的抗生素有很多，例如嘌呤霉素、G418、卡那霉素、四环素和博来霉素等等。 ，用嘌呤霉素感染细胞 1 周或更长时间，通过 RT-qPCR 和 WB 分析确定转染的效率。
71920编辑于 2023-03-10 - 来自专栏芒果先生聊生信
慢病毒：肿瘤研究的利器
（来自吉满生物公众号） 常用的293T细胞转染效率就很高，但是大多数细胞转染效率通常比较低。据芒果本人经验，慢病毒在构建过表达、干扰和敲除方面都是效率极高的，甚至可以用于假病毒包装。 CAS9稳转细胞的构建 实验流程 制备慢病毒穿梭质粒及辅助包装质粒，用无内毒素的试剂盒抽提，共转染 293T 细胞，转染后 18小时后更换为完全培养基，培养 48 小时后，收集富含慢病毒颗粒的细胞上清液 293T细胞：细胞铺板，6孔板按照（6~8）x10^5/孔铺板，一般早上铺板，第二天下午就可以做转染了。 转染体系：pLenti-CAS9-puro，pSPAX2, pMD2G按照4：3：1的比例（2μg，1.5μg和0.5μg）混匀，再与转染试剂混匀加入前天准备好的293T细胞中，钙转或PEI转染，293T 转染18~24小时后，更换为新鲜培养基。 病毒收集：转染后 48 小时收集病毒上清，0.45 μm滤器过滤，2mL EP管中，4℃，3000g/min 离心 5分钟。
2.1K10发布于 2020-08-04
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