二、eProteinDiscovery系统的核心技术eProteinDiscovery是Nuclera开发的一种无细胞蛋白合成系统(CFPS),也被称为体外转录/翻译系统。 三、Nuclera无细胞蛋白表达流程NucleraeProteinDiscovery无细胞蛋白表达流程示意eProteinDiscovery系统的核心工作流程主要分为三个阶段。 关于技术来源本文内容整理自Nuclera相关技术资料。上海曼博生物(MineBio)长期关注无细胞蛋白表达技术在生命科学研究中的应用。 参考技术资料:https://www.mine-bio.com/nuclera/
本文基于Nuclera eProtein Discovery系统与Biacore SPR技术公开资料,对BTK抑制剂筛选中的无细胞蛋白表达、构建体优化、生物素化修饰以及SPR动力学分析流程进行整理,并介绍从 Nuclera公司的eProtein Discovery系统采用数字微流控卡盒与定制试剂体系,可同时筛选多种蛋白构建体及表达条件,并实现从表达、纯化到功能分析的快速衔接。 图1:Nuclera无细胞蛋白表达系统该系统可同时自动筛选多达24种可溶性蛋白或11种膜蛋白,并对每种蛋白评估多个表达条件。筛选结果还可用于后续体内表达优化,包括大肠杆菌菌株选择及质粒设计等流程。 本研究展示了一套基于Nuclera eProtein Discovery系统与Biacore SPR技术的自动化工作流程,可在约5天内完成从DNA模板到BTK蛋白功能表征的完整过程。
例如,英国蛋白技术公司 Nuclera 开发的 eProtein Discovery 系统,将无细胞蛋白表达与数字微流控技术结合,实现从 DNA 构建体到蛋白表达与筛选的自动化流程。