本文主要介绍下通过picard这个工具来评估文库复杂度,用法如下 java -jar picard.jar \ EstimateLibraryComplexity \ I=input.bam \ O=lib_complex_metrics.txt
今天,我将向你介绍Picard的主要功能、它的优缺点,以及如何通过Galaxy平台(usegalaxy.cn)来简化使用。 Picard是什么? Picard 是一个开源的Java工具集,专门用于操作和分析高通量测序数据。Picard被广泛应用于生物信息学领域,特别是在处理以BAM和SAM格式存储的测序数据时,它表现尤为出色。 Picard的优缺点 优点 • 功能强大且全面:Picard的功能涵盖了从去除PCR重复到文库复杂性评估等多个常见分析需求,极大地方便了测序数据的处理。 在Galaxy平台上使用Picard 如果你对命令行操作不太熟悉,或者希望更简便地使用Picard,Galaxy生信云平台 提供了一个图形化的解决方案。 你可以通过中国的Galaxy实例 usegalaxy.cn 来访问和运行Picard。 如何在Galaxy上使用Picard? 1.
AI科技评论按:本文将为大家介绍一位在世界 AI 江湖享有特殊声望的人工智能大牛—— Rosalind Picard。 而身为“情绪计算”之母的 Rosalind Picard,便是该领域首屈一指的专家。在机器学习算法工具日渐普及的今天,人们猛然醒觉“认知”“情感”正是创造出真正的 AI 的瓶颈。 于是,全世界的目光都投向了 Rosalind Picard 的研究。 Rosalind Picard 这次演讲中,我想要与大家分享很多故事。尤其自我早年受到 AI 启发后,研究中遇到的惊奇发现。 我年轻的时候,想要创造一个无比智能的 AI 。 有一天,实验室里的一名本科生对我说:“教授 Picard,我的弟弟不能说话,他有孤独症,我很想知道到底是什么事让他这么紧张?我能借一个智能腕带在圣诞假期时给我弟弟用吗?拜托了!”
以下命令展示了如何使用 Picard 来检查重复率。 ##== linux command ==## ## depending on how you load picard and your server environment, the picardCMD Adjust accordingly. picardCMD="java -jar picard.jar" mkdir -p $projPath/alignment/removeDuplicate/picard_summary /${histName}_picard.rmDup.txt 总结了明显的重复率,并计算出唯一的库大小而无需重复。 估计的文库大小是根据 Picard 计算的 PE 重复率来估算文库中独特分子数量的。 估计的文库大小与目标表位的丰度以及抗体的质量成正比,而 IgG 样本的估计文库大小通常会很低。
命令如下 java -jar picard.jar SamToFastq \ INPUT=${input_bam} \ FASTQ=/dev/stdout \ NON_PF=true | \ bwa mem -K 100000000 -p -v 3 -t 16 -Y ${bash_ref_fasta} /dev/stdin - | \ java -jar picard.jar 将ubam转换成fastq; 第二步bwa 比对参考基因组;第三步picard将原始数据ubam和比对产生的aligned bam 合并,产生一个最终的bam文件。 Mark Duplicates 标记bam文件中的重复序列,使用picard的MarkDuplicates命令,代码如下: java -jar picard.jar \ MarkDuplicates 标记完重复序列之后,需要对产生的bam文件进行排序,命令如下 java -jar picard.jar \ SortSam \ INPUT=${input_bam} \ OUTPUT=
和之前的版本相比,GATK4在算法上进行了优化,运行速率有所提高,而且整合了picard 软件的功能。GATK4基于java 语言开发的,需要java 1.8 版本。 子命令后面如果有(picard), 说明这个功能是继承于picard软件,从这里也可以看出,GATK4集成了picard软件的功能。再不需要像之前版本一样,混合使用picard 和 gatk 了。 总结 GATK4整合了picard软件,在算法上进行了优化,新增了许多新的功能。 官网给出了基于GATK4的pipeline, 以WDL这种workflow 流程管理语言编写。
const obj = { name: 'Jean-Luc Picard', age: 59, rank: 'Captain' }; obj.name; // 'Jean-Luc Picard 首先 // 每个嵌套数组的元素是键,第二个是值 ['name', 'Jean-Luc Picard'], ['age', 59], ['rank', 'Captain'] ]); // map.get('name'); // 'Jean-Luc Picard' 假设你想获得 Picard 船长的 age。对于一个对象,你可以用 obj.age。 在 Picard 船长的示例中,map.keys() 将始终按该顺序返回 name, age 和 rank 。 这也能够保证符合ES6的浏览器的对象键顺序。 const map = new Map([ ['name', 'Jean-Luc Picard'], ['age', 59], ['rank', 'Captain'] ]); const
回去就回去,gatk3代码是: module load java/1.8.0_91 GATK=/home/jianmingzeng/biosoft/GATK/GenomeAnalysisTK.jar PICARD =/home/jianmingzeng/biosoft/picardtools/2.9.2/picard.jar GENOME=/home/jianmingzeng/biosoft/GATK/resources basename $id ) sample=${file%%_*} echo $sample java -Djava.io.tmpdir=$TMPDIR -Xmx25g -jar $PICARD rna \ RGPL=illumina RGPU=hiseq RGSM=${sample} java -Djava.io.tmpdir=$TMPDIR -Xmx25g -jar $PICARD METRICS_FILE=$sample.metrics REMOVE_DUPLICATES=TRUE java -Djava.io.tmpdir=$TMPDIR -Xmx25g -jar $PICARD
-@ 10 \ --fasta GRCh38.p12.genome.fa \ --dbsnp dbsnp.chr9.hg38.vcf.gz \ --removetmp \ --picard $pathtopicard/picard.jar \ --gatk $pathtogatk/gatk \ --samtools $pathtosamtools/samtoolsstereo-seqspatialsnvtools -@ 10 \ --fasta GRCh38.p12.genome.fa \ --dbsnp dbsnp.chr9.hg38.vcf.gz \ --removetmp \ --picard $pathtopicard/picard.jar \ --gatk $pathtogatk/gatk \ --samtools $pathtosamtools/samtoolsSNV Calling
:samtools, bamo -readcount, HISAT2, stringtie, gffcompare, htseq-count, flexbar, R, ballgown,fastqc和picard-tools /fastqc --help MultiQC pip3 install multiqc multiqc --help Picard wget https://github.com/broadinstitute /picard/releases/download/2.18.15/picard.jar -O picard.jar java -jar $RNA_HOME/student_tools/picard.jar
2. picard MarkDuplicates picard的MarkDuplicates命令称得上是使用的最广泛的去除PCR重复的工具了,要求输入的bam文件为按照比对位置排序之后的文件,用法如下 第一步,按照coordinate排序bam文件 samtools sort -o positionsort.bam input.bam # 第二步,运行MarkDuplicate命令 java -jar picard.jar markdup.bam \ M=markdup.metrc.csv 3. sambamba sambamba是一款比samtools速度更快的操作BAM文件的工具,也提供了markdup命令,其PCR重复的判定方法和picard
picard提供了一个FastqToSam功能,可以将序列转换成ubam格式。 基本用法如下: java -jar picard.jar FastqToSam F1=sampleA_R1.fastq.gz F2=sampleA_R2.fastq.gz PL= 通过FastqToSam可以从fastq文件得到ubam文件,picard 还提供了SamtoFastq命令,从bam 文件得到fastq 文件 用法如下: java -jar picard.jar SamToFastq 总结 通过picard工具,可以轻松实现FASTQ和uBAM格式之间的转换。
纽约哥伦比亚大学的心理生物学家Martin Picard说,由于它们看起来闲着没事,生物学家曾认为,这些宛如僵尸的衰老细胞的能量消耗应低于仍在复制的年轻细胞。 在Picard和同事看来,这种能量使用上的不匹配并不矛盾:衰老细胞会积累一些高能耗的损伤如DNA改变,并激活促炎信号。 来源:Ref. 2Picard及其同事将这一观点称为“大脑–身体能量节约模型”。 Picard及其团队认为,他们提出的“大脑-身体能量节约模型”可能为此提供理论框架,用以解释压力效应如何从大脑传导至全身。 Picard团队在今年发布的预印本研究中揭示,人体血液和唾液中的GDF15水平会因心理压力刺激而升高[13]。
BaseRecalibrator) Apply base quality score recalibration (ApplyBQSR) Merge CRAMs of every sample, repesectly (Picard LearnReadOrientationModel) Filter somatic SNVs and indels called by Mutect2 (FilterMutectCalls) Merge all the VCF files (Picard
用于移除PCR重复的一个常用程序是Picard的MarkDuplicates工具。 # 安装一下 picard wget https://github.com/broadinstitute/picard/releases/download/3.3.0/picard.jar # 测试一下是否可以使用 java -jar picard.jar -h # 生成 rmDup.sh # REMOVE_DUPLICATES=false: mark duplicate reads, not remove. while read id do echo "java -XX:ParallelGCThreads=30 -Djava.io.tmpdir=/tmp -jar /nas2/zhangj/biosoft/picard /picard.jar MarkDuplicates QUIET=true INPUT=${id}.rmChrM.bam OUTPUT=${id}.rmDup.bam METRICS_FILE=${id
align reads of each sample in a run against reference genome (using STAR) and add read groups (using Picard ) perform quality control on generated BAM files (using Picard) count reads in features (using HTSeq-count
aligned_rmdup.bam> # 会直接取出掉那些重复的reads # samtools index samtools index <aligned_rmdup.bam> GATK and picard compatibility) # picard sort java -Xmx10g -jar /home/zf/software/picard/build/libs/picard.jar SortSam \ INPUT=aligned.sam OUTPUT=aligned_sort.bam SORT_ORDER=coordinate # picard rmeomv dupilcate java -Xmx10g -jar /home/zf/software/picard/build/libs/picard.jar \ MarkDuplicates INPUT=aligned_sort.bam \ OUTPUT index java -Xmx10g -jar /home/zf/software/picard/build/libs/picard.jar \ BuildBamIndex INPUT=aligned_rmdup.bam
Starting with version 4.0, GATK contains a copy of the Picard toolkit, so all Picard tools are available
example_dup 其中第二条已经被picard标注出来了。被标注的第二列flag会加1024。 去重的软件中samtools rmdup (基本已不用),samtools markdup(更新后的)和picard最常用。 picard与samtools markdup效果相似(仿佛调用的同一个?并不确定)。都可以标记重复,也可以选择直接去掉。 以下是用法: samtools markdup -@ 8 -r test.bam filter_test.bam # -r是直接去掉重复,不加是直接标记 picard去重有三种方式可选,在DUPLICATE_SCORING_STRATEGY picard MarkDuplicates I=test.bam O= filter_test.bam M=dup_metrics.txt REMOVE_DUPLICATES=true 4.peak
%N)echo SortSam `date`java -Djava.io.tmpdir=$TMPDIR -Xmx40g -jar $PICARD SortSam SORT_ORDER=coordinate %N)echo MarkDuplicates `date`java -Djava.io.tmpdir=$TMPDIR -Xmx40g -jar $PICARD MarkDuplicates \INPUT %N)echo FixMateInfo `date`java -Djava.io.tmpdir=$TMPDIR -Xmx40g -jar $PICARD FixMateInformation \INPUT /picard-tools/1.119/picard-tools-1.119.zipunzip picard-tools-1.119.zipmkdir 2.9.2 && cd 2.9.2 wget https ://github.com/broadinstitute/picard/releases/download/2.9.2/picard.jarcd ~/biosoft## https://sourceforge.net